invivogen Zeocin說明書
| Zeocin™ (solution) | Unit size | Cat. code |
|---|---|---|
Selective antibiotic for the Sh ble gene | 500 mg (5 x 1ml) 1g (10 x 1 ml) 5g (50 x 1 ml) 5 g (50 ml bottle) | ant-zn-05 ant-zn-1 ant-zn-5 ant-zn-5b |
| Zeocin™ (powder) | Unit size | Cat. code |
|---|---|---|
Selective antibiotic for the Sh ble gene | 1 g (powder) 5 g (powder) | ant-zn-1p ant-zn-5p |
InvivoGen 是全球的 Zeocin™ 生產(chǎn)商。
Zeocin™ 是腐草霉素D1的制劑，一種由Streptomyces CL990生產(chǎn)的銅螯合糖肽抗生素 。 Zeocin™ 通過嵌入 DNA 并切割 DNA 來導致細胞死亡。
Zeocin™ 的作用對大多數(shù) 需氧細胞有效。因此，Zeocin™ 是一種流行且有效的抗生素，用于 在各種細胞類型（細菌、真核微生物、植物和動物細胞）中選擇帶有Sh ble基因的載體 。
Zeocin™ 抗性是由來自印度鏈球菌的Sh ble基因產(chǎn)物賦予的，它在與抗生素結(jié)合后使 Zeocin™ 失活 [1-3]。Sh ble是一個 370bp 大小的小基因，在許多 InvivoGen 的載體中都攜帶。
通常，哺乳動物細胞對 50-400 µg/ml 的 Zeocin™ 濃度敏感，而細菌對 25 µg/ml 的濃度敏感。
僅供研究使用
參考：
1. Drocourt D. 等，1990。用于將低等和高等真核生物轉(zhuǎn)化為腐草霉素抗性的 Streptoalloteichus hindustanus ble 基因盒。核。酸。水庫 18: 4009。2
. Gatignol A. 等人，1988 年。FEBS快報。230：171-5。
3. Dumas P. 等，1994. Embo J. 242 (5) 595-601。
InvivoGen 的 Zeocin™產(chǎn)品濃度： 100 mg/ml 溶液
CAS號： 11006-33-0
質(zhì)量控制：每個批次都經(jīng)過*測試，以確保沒有批次間的差異。
內(nèi)毒素水平： < 1 EU/mg
理化表征： HPLC、pH、外觀
細胞培養(yǎng)測試：在 Zeocin™ 敏感和 Zeocin™ 抗性哺乳動物細胞系中驗證效力
微量污染物的非細胞毒性：在 Zeocin™ 抗性細胞中證實沒有長期影響
回到頂部Zeocin™ 以無菌過濾藍色溶液的形式提供，濃度為 100 mg/ml，在 HEPES 緩沖液中。
本產(chǎn)品提供三種包裝尺寸：
ant-zn-1： 10 x 1 毫升（1 克）
ant-zn-5： 50 x 1 毫升（5 克）
ant-zn-5b： 1 x 50 毫升（5 克）
Zeocin™ 也以藍色粉末形式提供：
ant-zn-1p： 1 x 1 克
ant-zn-5p： 1 x 5 克
Zeocin™ 在室溫下運輸。
收到后應在 4°C 或 -20°C 下儲存。
Zeocin™ 是一種有害化合物。有關(guān)操作說明，請參閱安全數(shù)據(jù)表。
Zeocin™ 通常以 100 μg/ml 的濃度使用，是原液的 1000 倍稀釋液。但是，需要為您的細胞確定最佳濃度。
下面列出了在某些哺乳動物細胞示例中選擇的 Zeocin™ 的建議濃度：
細胞系 | 中等的 | Zeocin™ 濃 | 參考 |
|---|---|---|---|
B16（小鼠黑色素細胞） | RPMI | 20-250 微克/毫升 | 1-3 |
CHO（中國倉鼠卵巢細胞） | DMEM | 100-500 微克/毫升 | 1、4、5 |
COS（猴腎細胞） | DMEM | 100-400 微克/毫升 | 6、7 |
| HEK293（人胚胎腎細胞） | DMEM | 100-400 微克/毫升 | 8、9 |
| HeLa（人類子宮細胞） | DMEM | 50-100 微克/毫升 | 10、11 |
| J558L（小鼠黑色素細胞） | RPMI | 400 微克/毫升 | 12 |
| MCF-7（人乳腺腺癌細胞） | DMEM | 100-400 微克/毫升 | 13、14 |
| MEF（小鼠胚胎成纖維細胞） | DMEM | 200-400 微克/毫升 | 15、16 |
| THP-1（人類單核細胞） | RPMI | 200 微克/毫升 | 17 |
參考：
1. Bouayadi K. 等，1997。DNA 聚合酶 beta 的過度表達使哺乳動物細胞對 2',3' 脫氧胞苷和 3'-疊氮基-3'-脫氧胸苷敏感。癌癥研究。57：110-116。
2 Hirose Y. 等人，2012 年。抑制 Stabilin-2 可提高循環(huán)透明質(zhì)酸水平并防止腫瘤轉(zhuǎn)移。PNAS, 109: 4263 - 4268.
3. Fan H. et al., 2012. 使用碳納米管的腦內(nèi) CpG 免疫療法消除了小鼠皮下黑色素瘤的生長。臨床癌癥研究 18(20):5628-38。
4. Li F. 等人，1996 年。重組 P 選擇糖蛋白配體 1 的翻譯后修飾，這是與 P 和 E 選擇結(jié)合所需的。J.生物。化學 271：3255-3264。
5. Ogura T. 等人，2004 年。B16 黑色素瘤細胞對 CD47 誘導的運動負調(diào)節(jié)的抗性，這是由于 SHPS-1 的異常 N-糖基化所致。J 生物化學。279（14）：13711-20。
6. Saxena A. 等，2002。H2，人類去唾液酸糖蛋白受體的次要亞基，在細胞內(nèi)運輸并形成同源寡聚體，但不結(jié)合去唾液酸-口粘蛋白。J 生物化學。277(38):35297-304。
7. Kanamori A. 等人，2002. 使用支持所有三種選擇素在剪切流下介導的滾動的細胞公開了選擇素的不同硫酸化要求。L-選擇素更喜歡碳水化合物 6-硫酸化酪氨酸硫酸化，而 p-選擇素則不然。J 生物化學。277(36):32578-86。
8. Ahmed 等人，2013 年。TRIF 介導的 TLR3 和 TLR4 信號傳導受到 ADAM15 的負調(diào)控。J免疫學。190（5）：2217-28。
9. Büllesbach EE。& Schwabe C.，2006。松弛素樣因子 (RLF) 與富含亮氨酸重復 G 蛋白激活受體的相互作用模式 8。J Biol Chem。281(36):26136-43。
10. Mesnil M. et al., 1996. 單純皰疹病毒胸苷激酶基因?qū)Π┘毎呐杂^者殺傷是由連接蛋白介導的。PNAS 93(5):1831-5。
11. Maszczak-Seneczko D. 等人，2013 年。UDP-N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白 (SLC35A3) 調(diào)節(jié)高度支化 N-聚糖和硫酸角質(zhì)素的生物合成。J 生物化學。288(30):21850-60。
12. Cedeno-Laurent F. 等人，2010 年。開發(fā)用于研究白細胞 galectin-1 配體和免疫疾病調(diào)節(jié)作用的新生 galectin-1 嵌合分子。J免疫學。185（8）：4659-72。
13. 金 HS。等人，2004 年。胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白 3 通過 MCF-7 人乳腺癌細胞中的死亡受體介導途徑誘導半胱天冬酶依賴性細胞凋亡。癌癥研究。64（6）：2229-37。
14. 列出 HJ。等人，2001 年。核酶靶向表明核受體輔激活因子 AIB1 是人類 MCF-7 乳腺癌細胞雌激素依賴性生長的限速因子。J 生物化學。276（26）：23763-8。
15. Waak J. 等，2009。介導蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和 DJ-1 與細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶 1 的細胞保護相互作用的可氧化殘基。J Biol Chem。284（21）：14245-57。
16. Maue A. 等人，2013 年。空腸彎曲桿菌的多糖膠囊調(diào)節(jié)宿主免疫反應。感染免疫。81(3):665-72
你們提供的 Zeocin™ 是鹽酸還是硫酸鹽？
我們提供鹽酸 Zeocin™。
Zeocin™ 是光敏的嗎？
不，Zeocin™ 不具有光敏性。
Zeocin™ pH 值敏感嗎？
Zeocin™ 在低和高 pH 值（<6 和 >8）或弱氧化劑存在下會發(fā)生不可逆的變性。
什么緩沖液可用于稀釋 Zeocin™ 以制備中間工作溶液？
應在無菌水中進一步稀釋，以創(chuàng)建中間工作溶液。
用于重構(gòu) Zeocin™ 的 HEPES 緩沖液的濃度是多少？
用于重構(gòu) Zeocin™ 的 HEPES 緩沖液濃度為 5 g/L。
Zeocin™ 的儲存方法是什么？
Zeocin™ 在室溫下運輸。收到后，應在 4°C 下短期儲存或在 -20°C 下長期儲存。
避免重復的凍融循環(huán)。
有效期在產(chǎn)品標簽上注明。
對于 Zeocin™ 粉末，一旦以 100 mg/ml 重懸，它可以在 4°C 下儲存 12 個月或在 -20°C 下儲存 18 個月。
對于 Zeocin™ 溶液，一旦打開，它可以在 -20°C 下保持穩(wěn)定 1 年，避免重復凍融循環(huán)，如果保持在無菌條件下，它可以在 4°C 下保存 3 個月。
Zeocin™ 在哺乳動物細胞中的選擇濃度是多少？
Zeocin™ 在哺乳動物細胞系中的工作濃度在 50 - 400 μg/ml 之間變化，有少數(shù)報道使用較低（即 20 μg/ml）和較高（即 1000 μg/ml）濃度的案例。在初始實驗中，我們建議確定殺死宿主細胞系所需的最佳 Zeocin™ 濃度。有關(guān)更多詳細信息，請參閱該產(chǎn)品的技術(shù)數(shù)據(jù)表。
Zeocin™ 在大腸桿菌中的選擇濃度是多少？
在補充有 25 μg/ml Zeocin™ 的低鹽 LB 瓊脂中選擇 Zeocin 抗性轉(zhuǎn)化體。
重要提示：不要使用含有 Tn5 轉(zhuǎn)座因子（即 MC1066）的大腸桿菌受體菌株。Tn5 編碼一種博萊霉素抗性基因，可賦予 Zeocin™ 抗性。
