BioLamina是一家瑞典生物技術公司，業(yè)務遍及。我們提供廣泛的化學成分和無動物成分的層粘連蛋白組合，用于多種應用，包括多能細胞的可靠擴增和特化細胞類型的分化和維持，如肝細胞，骨骼肌細胞和不同的神經(jīng)細胞。

我們以的產(chǎn)品，能力，奉獻精神和服務而聞名和認可，并將自己定位于細胞培養(yǎng)的前沿。我們的高科技產(chǎn)品有助于提高客戶的效率和科學突破，使他們開啟醫(yī)學研究的新紀元。BioLamina的Biolaminins™是市場上僅有的原始全長，人類，重組層粘連蛋白細胞培養(yǎng)基質(zhì)，我們的Biolaminin基質(zhì)對細胞培養(yǎng)質(zhì)量的影響已經(jīng)在許多具有高影響力的期刊中得到科學驗證。

BioLamina建立在科學基礎之上，具有基質(zhì)生物學的遺產(chǎn)和基于細胞培養(yǎng)的研究的豐富經(jīng)驗。該公司成立于2009年，由Karl Tryggvason博士及其兒子Kristian Tryggvason博士共同創(chuàng)立。如今，該公司在生產(chǎn)，研發(fā)，物流，銷售和營銷方面擁有約20名員工。我們的質(zhì)量體系符合ISO 9001：2015標準，管理層和員工均遵循明確的標準流程和協(xié)議。

BIOLAMININ 521 MX（MX521）

人重組層粘連蛋白521

重建天然細胞生態(tài)位是成功培育的關鍵。BM中不同層粘連蛋白同種型的物理，拓撲和生物化學表達是異質(zhì)的和組織特異性的。 

Biolaminin 521 MX（MX521）是多能干細胞的天然層粘連蛋白，因此可以在化學成分確定的無飼養(yǎng)細胞和無動物成分的干細胞培養(yǎng)系統(tǒng)中可靠地促進人ES和iPS細胞的自我更新。MX521能夠?qū)z傳穩(wěn)定和多能干細胞進行有效的單細胞傳代，無需任何細胞凋亡抑制劑，從而提高細胞質(zhì)量和研究質(zhì)量。 

出生后，α5-層粘連蛋白代表體內(nèi)常見的層粘連蛋白，MX521支持許多不同的組織細胞類型，如來自胰腺，血管，神經(jīng)和肌肉系統(tǒng)的細胞。
 

BIOLAMININ 521產(chǎn)品說明書

功能和規(guī)格：

• 研究級基材

• 動物成分免費到中學水平

• 生物學相關的文化環(huán)境

• 同源和遺傳穩(wěn)定的hPSC培養(yǎng)物

• 簡單靈活的文化系統(tǒng)

• 一致可靠的性能

• 快速擴大規(guī)模

• 輕松適應自動化平臺

• 支持周末免費喂養(yǎng)制度

• 有效的分化和增強的細胞成熟，極化和組織

• 科學證明

生物相關的文化環(huán)境

Biolaminin 521 MX是一種全長的人類重組層粘連蛋白521底物，是市場上僅有的此類底物，為hPSCs的無飼養(yǎng)細胞培養(yǎng)提供了宜環(huán)境。層粘連蛋白521是天然干細胞生態(tài)位的關鍵細胞粘附蛋白，由胚胎內(nèi)細胞團中的hPSC表達和分泌。Biolaminin 521底物在體外重建了生物學相關的hPSC環(huán)境  ，促進依戀，高生存率和強大的hPSCs長期自我更新。此外，更真實的培養(yǎng)環(huán)境使多能干細胞更有效地分化，增強細胞成熟，極化和特化細胞類型的組織。層粘連蛋白521細胞培養(yǎng)基質(zhì)對hES細胞系之間的多能基因表達譜的穩(wěn)定和均質(zhì)化具有積極作用，與飼養(yǎng)細胞和許多其它無飼養(yǎng)細胞培養(yǎng)系統(tǒng)相比，提供了更可控和更穩(wěn)健的培養(yǎng)系統(tǒng)。通過與相關細胞表面受體的相互作用，層粘連蛋白激活細胞信號級聯(lián)（例如PI3K / Akt途徑），提供一致的細胞反應和改善的細胞功能，終節(jié)省研究人員的時間和成本。
 

MX521干細胞基質(zhì)可實現(xiàn)高膨脹率，單層均勻生長，并保持多能性。細胞在遺傳上是穩(wěn)定的，沒有核型異常。與飼養(yǎng)細胞或其他無飼養(yǎng)細胞培養(yǎng)的細胞相比，hESC和iPSC在MX521上生長更快，促進了自動化。人多能干細胞可以常規(guī)培養(yǎng)為單細胞而不添加ROCKi。MX521還支持hES和iPS細胞的有效克隆存活和擴增，極大地促進了多能細胞中基因組改變和操作的研究。此外，使特定組織細胞更有效地重編程為iPSC。

與基于飼養(yǎng)細胞的培養(yǎng)系統(tǒng)相比，Biolaminin 521底物更靈活，更易于使用且更省力，并且符合任何市售的無血清培養(yǎng)基。細胞以均勻的單層生長，易于監(jiān)測，具有保持多能性和遺傳完整性。強大而靈活的文化環(huán)境允許獨立于操作員的文化維護和可靠的標準化協(xié)議，可輕松適應自動化平臺。

出生后，層粘連蛋白521代表體內(nèi)常見的層粘連蛋白之一，并與其他層粘連蛋白同種型一起，它支持許多不同組織細胞類型的有效擴增和分化。

詳細了解不同的層粘連蛋白細胞培養(yǎng)應用

下載細胞培養(yǎng)應用海報

人類干細胞培養(yǎng)

在
生物相關和無動物成分的環(huán)境中  容易地培養(yǎng)人ES和iPS細胞

克隆細胞培養(yǎng)

有效的克隆培養(yǎng)和
人多能干細胞的  衍生

涂層板

請參閱涂層方案說明，推薦的涂層體積和濃度。

MX521上的HPSC文化

參見 Biolaminin 521上干細胞培養(yǎng)的說明，包括：- 轉(zhuǎn)移- 傳代- 解凍  - 在MX521上冷凍保存hPSC。  


 

胚胎體形成

在Biolaminin 521底物上培養(yǎng)的hPSC形成胚狀體的方案

重要筆記

• “僅供研究使用”

• 避免蛋白質(zhì)長時間暴露在環(huán)境溫度下

• 根據(jù)ISCT指導文件“ISCT無動物源調(diào)查結果 - 摘要”，CT521是動物來源免于中學水平。

• 當在-20°C至-80°C下儲存時，層粘連蛋白原液可穩(wěn)定3年。當在無菌條件下在+ 2°C至+ 8°C下儲存時，解凍的未稀釋的層粘連蛋白原液可穩(wěn)定至少3個月。

• 應避免反復凍融。如果需要，可以將層粘連蛋白原液分配到工作等分試樣中并儲存在-20℃至-80℃。

• 為方便起見，無菌保存在+ 2°C至+ 8°C時，涂層板可保存長達4周

• 通過選擇培養(yǎng)基和解離試劑，可以輕松*定義和無異種方案

• 轉(zhuǎn)移到MX521基質(zhì)的細胞具有高質(zhì)量是很重要的

• 轉(zhuǎn)移到MX521基質(zhì)的一些hPSC細胞系可能需要適應期才能根據(jù)單細胞傳代方案進行培養(yǎng)

• 一旦適應MX521基質(zhì)，hPSC可以常規(guī)培養(yǎng)為不含ROCKi的單細胞

故障排除

Biolaminin板涂層

不均勻的細胞擴散，通常是涂層問題，可能由以下原因引起：

• 使用的涂料濃度低。增加涂層濃度足以支持均勻的細胞生長。
• 涂層覆蓋率差/板已干燥。在制備新鮮板時，確保層粘連蛋白涂層溶液覆蓋整個表面。此外，不要讓板干燥，因為這會使層粘連蛋白涂層失活。在沒有密封的情況下，在培養(yǎng)箱中長時間存放或長時間存放會導致過多的蒸發(fā)，從而使部分板干燥（通常在中心）。

 
從其他基材轉(zhuǎn)移

• 我們建議將細胞轉(zhuǎn)移為單個細胞（或小團塊），并且在初的幾（3-5）次傳代中始終加入ROCKi。一旦細胞適應MX521基質(zhì)，細胞可以作為沒有ROCKi的單細胞培養(yǎng)。這可能需要多達5個段落。
• 如果細胞難以適應，嘗試將包衣濃度增加至10ug / ml并以更高的細胞密度接種50,000-100,1000個細胞/ cm ²。一旦細胞適應，通?？梢允褂幂^低的包衣和接種濃度。
• 轉(zhuǎn)移到MX521基質(zhì)的細胞具有高質(zhì)量是很重要的。MX521通常也會支持分化細胞，因此請仔細選擇未分化的細胞區(qū)域進行轉(zhuǎn)移。
• MX521與大多數(shù)商業(yè)媒體品牌結合使用效果很好。然而，可以預期細胞形態(tài)將根據(jù)用于培養(yǎng)的培養(yǎng)基而看起來不同。

hPSC分裂和播種

• 我們建議將單細胞傳代或傳代作為小團塊。
• 干細胞是敏感的，當使用酶時，不要對細胞進行太長時間處理，因為這樣會破壞細胞。與其他基質(zhì)相比，細胞在層粘連蛋白上更緊密地附著，并且在沒有首先松散細胞的情況下刮擦或移液可以影響細胞完整性和活力，這可能導致第二天較少的附著。較少融合的細胞需要較短的治療時間，而更融合的細胞可能需要更長的治療時間。細胞應易于分離，無需過多移液。不要使用過多的機械力（大量移液或刮擦），否則會損壞細胞。增加解離試劑的孵育時間而不是增加力。如果細胞非常堅硬地粘附在MX521表面上，請嘗試降低涂層濃度。
• 播種后：大多數(shù)細胞應在1小時后附著，細胞應均勻分布在整個平板上。如果接種后細胞死亡很多，那么在分裂過程中細胞很可能被治療過于嚴厲。
• 接種后第二天：細胞已經(jīng)遷移并且應該形成小的集落并且將繼續(xù)作為同質(zhì)單層擴增。當細胞培養(yǎng)物為60-99％匯合時，在MX521基質(zhì)上培養(yǎng)的細胞準備好傳代。取決于細胞系，接種密度和使用的培養(yǎng)基，培養(yǎng)物通常在接種后3-6天傳代。